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[问答交流] 估以检测沉默活性

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发表于 2023-8-22 17:48:18 | 显示全部楼层 |阅读模式
畜共患疾病,在地理边界之外重新出现,具有潜在危害。人类感染的主要表现是发热,可发展为脑炎、视网膜炎、出血热和死亡。RVFV 没有授权药物。RNA 干扰 (RNAi) 基因沉默途径极其保守。通过靶向特定基因,小干扰 RNA (siRNA) 可用于抑制病毒复制。本研究的目的是设计针对 RVFV 的特异性 siRNA,并评估其对 Vero 细胞的预防和抗病毒作用。 方法

和结果 使用不同的生物信息学工具设计了各种 siRNA。三种独特的候选物针对埃及绵羊细胞培养适应菌株 BSL-2 进行了测试,该菌株抑制 RVFV N mRNA 表达。在RVFV感染前一天(转染前)和病毒感购购买群发短信服务染后1小时(转染后)转染SiRNA,并使用





实时PCR和TCID50终点测试进行评和基因表达减少。病毒感染后48小时通过蛋白质印迹测定N蛋白表达程度。D2 靶向 RVFV N mRNA 的中间区域(488-506 个核苷酸),是浓度为 30 nM 时最有效的 siRNA,当用作抗病毒或预防性治疗时,它几乎消除了 N mRNA 的表达。 结论 siRNA 转染前后显着降低了细胞系中的 RVFV 滴度,提供了新颖且潜在有效

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